1 問(wèn)：PanaceaGel是什么？
答：PanaceaGel是化學(xué)合成的肽水凝膠，PH為中性。該凝膠為透明、生物可降解、3D網(wǎng)絡(luò)支架，不包含任何生物來(lái)源的成分，小瓶盛裝。
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2 問(wèn)：PanaceaGel是什么材質(zhì)的？
答：PanaceaGel100%是由13個(gè)天然氨基酸化學(xué)合成的肽。原子力顯微鏡（AFM）和電鏡(SEM,TEM)觀察也發(fā)現(xiàn)，水溶液中小肽根據(jù)天然3D網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)自發(fā)組裝成納米纖維。由合成肽和碳酸鈉調(diào)節(jié)水凝膠PH值，約8.5%的海藻糖作為等滲試劑調(diào)節(jié)滲透壓。
3 問(wèn)：PanaceaGel剛性如何？
答：隨著肽濃度和混合物中鹽濃度變化，PanaceaGel剛性不斷變化。培養(yǎng)細(xì)胞分泌的細(xì)胞外基質(zhì)也會(huì)影響其機(jī)械強(qiáng)度。例如流變學(xué)測(cè)量顯示，以2:1的比例混合PanaceaGel（0.4%）和DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)，儲(chǔ)能模量（G’）和損耗模量（G’’）分別為97.0 ± 2.1 Pa 和 15.3 ± 1.4 Pa。
4 問(wèn)：PanaceaGel需要滅菌么？
答：發(fā)貨前PanaceaGel已經(jīng)經(jīng)過(guò)高壓滅菌。無(wú)需進(jìn)一步滅菌。
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5 問(wèn)：如何儲(chǔ)存PanaceaGel？
答：PanaceaGel需在4-25℃避光保存。
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6 問(wèn)：室溫條件下PanaceaGel穩(wěn)定性如何？
答：未開(kāi)封的PanaceaGel在4-25℃時(shí)保存在黑暗處能放置6個(gè)月。長(zhǎng)期穩(wěn)定性研究正在進(jìn)行中。
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7 問(wèn)：PanaceaGel應(yīng)用于細(xì)胞懸液時(shí)需進(jìn)行任何預(yù)處理么？
答：不需要。PanaceaGel的PH為中性，所以用于細(xì)胞懸液時(shí)無(wú)需再平衡。二者極易混合，但液體混合時(shí)一定要迅速，因?yàn)?span lang="EN-US">PanaceaGel只要暴露于培養(yǎng)基中的鹽中流動(dòng)性就會(huì)大大降低。
8 問(wèn)：PanaceaGel能用于何種細(xì)胞？
答：已經(jīng)使用PanaceaGel成功培養(yǎng)了以下細(xì)胞：
小鼠骨骼肌細(xì)胞(C2C12)
大鼠骨骼肌細(xì)胞(L6)
小鼠成纖維細(xì)胞(NIH3T3)
人成纖維細(xì)胞(TIG-1)
人軟骨肉瘤細(xì)胞(OUMS-27)
新生的心肌細(xì)胞（直接分離得到）
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9 問(wèn)：PanaceaGel和其他細(xì)胞三維培養(yǎng)材料有何異同？
答：參考下表
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|
PanaceaGel |
膠原Collagen |
生物可降解聚合物
Biodegradable polymer |
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來(lái)源 |
合成 |
動(dòng)物源性 |
合成 |
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剛性 |
中等 |
中等 |
硬 |
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PH |
中性 |
中性、酸性 |
中性 |
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生物親和性 |
良好 |
極佳 |
良好 |
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透明度 |
高 |
高 |
低 |
10 問(wèn)：實(shí)驗(yàn)中如何選擇PanaceaGel使用濃度？
答：有兩種濃度的PanaceaGel，分別為0.4%和0.8%。初始實(shí)驗(yàn)，推薦將0.4%的PanaceaGel和細(xì)胞懸液以1:1的比例等體積混合，獲取PanaceaGel終濃度為0.2%。0.8%的PanaceaGel能用于制作更高硬度的水凝膠。根據(jù)細(xì)胞類型不同，PanaceaGel和細(xì)胞的最佳密度也不同。
11 問(wèn)：在PanaceaGel中如何培養(yǎng)細(xì)胞？
答：參考試驗(yàn)步驟。
12 問(wèn)：使用PanaceaGel時(shí)需要特殊裝置么？
答：不需要
13 問(wèn)：最佳生長(zhǎng)條件和限制是什么？
答：細(xì)胞終濃度為5×105～1×106cells/mL，對(duì)大多數(shù)類型細(xì)胞都可以選擇普通培養(yǎng)基。PanaceaGel 3D培養(yǎng)細(xì)胞厚度不超過(guò)2mm。
14 問(wèn): PanaceaGel用過(guò)的細(xì)胞能再次培養(yǎng)么？
答：可以。破壞支架后通過(guò)移液能釋放細(xì)胞并再次培養(yǎng)。
15 問(wèn)：如何將生物活性物質(zhì)整合到PanaceaGel中（小肽，生長(zhǎng)因子等）？
答：生物活性物質(zhì)能添加到培養(yǎng)基或細(xì)胞懸液中。如果加入培養(yǎng)基中，生物活性物質(zhì)必須在30分鐘內(nèi)浸潤(rùn)并抵達(dá)細(xì)胞。若添加到細(xì)胞懸液中，需保持生物活性物質(zhì)最適濃度。
16 問(wèn)：能否在PanaceaGel表面培養(yǎng)細(xì)胞？
答：可以。添加細(xì)胞懸液前，PanaceaGel能包被培養(yǎng)皿、插件、孔板或其他細(xì)胞培養(yǎng)盤。加入細(xì)胞懸液時(shí)操作要輕柔，避免攪動(dòng)。
17 問(wèn)：PanaceaGel 3-D培養(yǎng)的細(xì)胞下游分析有哪些？
答：我們已成功進(jìn)行過(guò)以下實(shí)驗(yàn)：
-用DAPI 或PI或鈣黃綠素染細(xì)胞測(cè)免疫活性
-熒光試劑染色后進(jìn)行DNA 計(jì)數(shù)
-Western blot分析
-免疫染色
-SEM
-TEM
18 問(wèn)：PanaceaGel3D 培養(yǎng)的細(xì)胞能移植到體內(nèi)進(jìn)行分析么？
答：滿載細(xì)胞的PanaceaGel能植入活體動(dòng)物組織中，進(jìn)行專門活體研究。PanaceaGel本身是生物可降解的，體外研究中表明無(wú)毒性。
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